ESTANDARIZACIÓN DE PROTOCOLOS PARA LA EXTRACCIÓN DE ADN CROMOSÓMICO EN CEPAS DE colletotrichum gloeosporioides AISLADOS EN PLANTAS DE MANGO (Mangifera indica l.).

STANDARDIZATION PROTOCOLS FOR EXTRACTING CHROMOSOMAL DNA OF colletotrichum gloeosporioides STRAINS ISOLATED IN MANGO PLANTS (Mangifera indica L.)

Luis Alberto Valdés, Adys Gómez, María Elena Carballo, Maricela Capote, Ingrid González, W. Rohde

Resumen


Colletotrichum gloeosporioides (Penz) Penz & Sacc. es la especie responsable de la antracnosis en el mango; esta enfermedad afecta toda la parte aérea de la planta, produciendo pérdidas hasta de 12% de la producción. La identificación y caracterización microbiana es importante para la toma de medidas de prevención y control del patógeno en plantaciones. Esta investigación tuvo como objetivo estandarizar  protocolos de aislamiento de ADN genómico en cepas de Colletotrichum gloeosporioides (Penz) Penz & Sacc., que garantice calidad y concentración para futuros trabajos moleculares en diferentes representantes de esta especie fúngica. El aislamiento de ADN genómico se realizó por  tres metodologías: CTAB Doyle y Doyle (1990), Kuramane-Izioka (1997) con modificaciones y CTAB California modificado por Ramírez et al., (2004) conjugadas con juegos de reactivos comerciales NucleoSpin. La calidad del ADN obtenido fue comprobada por absorbancia medida a 260 y 280nm.  El primero de los métodos no resultó efectivo mientras que con los otros se obtuvo ADN genómico con la calidad y concentraciones adecuadas para investigaciones  moleculares con la especie. Las modificaciones realizadas al método Kuramane-Izioka (1997), contribuyeron a la efectividad del mismo. El método CTAB California modificado por Ramírez et al., (2004) constituye el primer informe de su uso para representantes del reino Fungi.


Palabras clave


Colletotrichum gloeosporioides, ADN cromosómico, CTAB Doyle y Doyle, Kuramane-Izioka y CTAB California modificado por Ramírez et al.

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DOI: http://dx.doi.org/10.17163/lgr.n22.2015.04

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